膠原酶IV型:建議用于胰腺中的胰島細(xì)胞消化
膠原酶II型:建議用于骨,心,肝,甲狀腺和涎腺細(xì)胞原代分離
膠原酶I型:建議用于上皮,肝,肺和腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞原代分離
答:膠原酶IV型:建議用于胰腺中的胰島細(xì)胞消化
膠原酶II型:建議用于骨,心,肝,甲狀腺和涎腺細(xì)胞原代分離
膠原酶I型:建議用于上皮,肝,肺和腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞原代分離
封片劑分兩種:流動(dòng)的和凝固的;美侖封片劑(MA0236/ MA0235/ MA0222/ MA0221)是甘油的,也就是流動(dòng)型的,故此不是凝固型,如果擔(dān)心移動(dòng),可在蓋玻片周圍用指甲油密封,并置于4℃或者-20℃避光保存;儲(chǔ)存不能豎立,最好平放。
答:封片劑分兩種:流動(dòng)的和凝固的;美侖封片劑(MA0236/ MA0235/ MA0222/ MA0221)是甘油的,也就是流動(dòng)型的,故此不是凝固型,如果擔(dān)心移動(dòng),可在蓋玻片周圍用指甲油密封,并置于4℃或者-20℃避光保存;儲(chǔ)存不能豎立,最好平放。首先:每條通路的靶點(diǎn)有很多,其次:這個(gè)抑制劑不一定作用您選的靶點(diǎn),最好是您找到相應(yīng)想做的靶基因,針對(duì)性挑選這個(gè)靶基因所對(duì)應(yīng)的抑制劑或者激活劑,后續(xù)需要用蛋白水平和RNA水平驗(yàn)證,最好有文獻(xiàn)支撐。
答:首先:每條通路的靶點(diǎn)有很多,其次:這個(gè)抑制劑不一定作用您選的靶點(diǎn),最好是您找到相應(yīng)想做的靶基因,針對(duì)性挑選這個(gè)靶基因所對(duì)應(yīng)的抑制劑或者激活劑,后續(xù)需要用蛋白水平和RNA水平驗(yàn)證,最好有文獻(xiàn)支撐。
GoldView I(MB0078)是一種可代替溴化乙錠(EB)的新型核酸染料。采用瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA時(shí),GoldView I與核酸結(jié)合后能產(chǎn)生很強(qiáng)的熒光信號(hào),其靈敏度與EB相當(dāng),使用方法與之完全相同。
GoldView I是一種熒光色素,激發(fā)濾光片波長(zhǎng)488nm,阻斷濾光片波長(zhǎng)515nm。GoldView I不僅能染DNA,也可用于染RNA,GoldView I與細(xì)胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別,可發(fā)出不同顏色的熒光(即著色特異性),這是由于DNA是個(gè)高度聚合物,吸收熒光物質(zhì)的位置較少,發(fā)綠色熒光,而RNA聚合度低,能和熒光物質(zhì)結(jié)合的位置多,故發(fā)紅色熒光。
通過(guò)小鼠皮下注射實(shí)驗(yàn),尚未發(fā)現(xiàn)GoldView有致癌作用,而溴化乙錠(EB)是一種強(qiáng)致癌劑,因此用GoldView代替EB不失為一種明智的選擇。
區(qū)別:GoldView I特別適合于大片段DNA的檢測(cè)(大于1kb的片段,檢測(cè)靈敏度與EB相當(dāng));當(dāng)DNA片段小于1kb時(shí),檢測(cè)靈敏度低于EB,特別是低于500bp的片段,GoldView I型可能亮度很弱或檢測(cè)不到。如果檢測(cè)小片段的DNA,請(qǐng)選用GoldView Ⅱ(MB0077)型核酸染色劑,該染色劑適合于檢測(cè)所有片段大小的DNA片段。
SYBR Green(MB3387)是高靈敏的DNA熒光染料。適用于各種電泳分析,操作簡(jiǎn)單,無(wú)須脫色或沖洗。至少可檢出20 pg DNA,高于EB染色法25~100倍。與dsDNA 結(jié)合熒光信號(hào)會(huì)增強(qiáng)800~1000倍。用核苷酸膠體染料染色的凝膠樣品熒光信號(hào)強(qiáng),背景信號(hào)低。可適用于多種電泳分析:瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠電泳、脈沖電場(chǎng)凝膠電泳和毛細(xì)管電泳等。核苷酸膠體染料與雙鏈DNA的親和力非常高,因此可用作電泳前染色,對(duì)分子生物學(xué)中常用的酶(如Taq酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶、T4連接酶等)沒(méi)有抑制作用,另外核苷酸膠體染料與EB相比,誘變能力大大降低。
答:
GoldView I(MB0078)是一種可代替溴化乙錠(EB)的新型核酸染料。采用瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA時(shí),GoldView I與核酸結(jié)合后能產(chǎn)生很強(qiáng)的熒光信號(hào),其靈敏度與EB相當(dāng),使用方法與之完全相同。
GoldView I是一種熒光色素,激發(fā)濾光片波長(zhǎng)488nm,阻斷濾光片波長(zhǎng)515nm。GoldView I不僅能染DNA,也可用于染RNA,GoldView I與細(xì)胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別,可發(fā)出不同顏色的熒光(即著色特異性),這是由于DNA是個(gè)高度聚合物,吸收熒光物質(zhì)的位置較少,發(fā)綠色熒光,而RNA聚合度低,能和熒光物質(zhì)結(jié)合的位置多,故發(fā)紅色熒光。
通過(guò)小鼠皮下注射實(shí)驗(yàn),尚未發(fā)現(xiàn)GoldView有致癌作用,而溴化乙錠(EB)是一種強(qiáng)致癌劑,因此用GoldView代替EB不失為一種明智的選擇。
區(qū)別:GoldView I特別適合于大片段DNA的檢測(cè)(大于1kb的片段,檢測(cè)靈敏度與EB相當(dāng));當(dāng)DNA片段小于1kb時(shí),檢測(cè)靈敏度低于EB,特別是低于500bp的片段,GoldView I型可能亮度很弱或檢測(cè)不到。如果檢測(cè)小片段的DNA,請(qǐng)選用GoldView Ⅱ(MB0077)型核酸染色劑,該染色劑適合于檢測(cè)所有片段大小的DNA片段。
SYBR Green(MB3387)是高靈敏的DNA熒光染料。適用于各種電泳分析,操作簡(jiǎn)單,無(wú)須脫色或沖洗。至少可檢出20 pg DNA,高于EB染色法25~100倍。與dsDNA 結(jié)合熒光信號(hào)會(huì)增強(qiáng)800~1000倍。用核苷酸膠體染料染色的凝膠樣品熒光信號(hào)強(qiáng),背景信號(hào)低??蛇m用于多種電泳分析:瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠電泳、脈沖電場(chǎng)凝膠電泳和毛細(xì)管電泳等。核苷酸膠體染料與雙鏈DNA的親和力非常高,因此可用作電泳前染色,對(duì)分子生物學(xué)中常用的酶(如Taq酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶、T4連接酶等)沒(méi)有抑制作用,另外核苷酸膠體染料與EB相比,誘變能力大大降低。
PHA-L是純化的L4,主要功能就是作為T淋巴細(xì)胞的刺激原,廣泛用于免疫學(xué)研究(如作為INF-γ ICS、ELISPOT實(shí)驗(yàn)的陽(yáng)性對(duì)照;或作為PBMC培養(yǎng)的刺激物),也可以作為順行神經(jīng)示蹤劑;PHA-M是植物血凝素的粘性蛋白形式,兩者成分相當(dāng),主要用于刺激外周單個(gè)核細(xì)胞增殖,促進(jìn)某些細(xì)胞因子的產(chǎn)生和膜表面蛋白的表達(dá)。
答:PHA-L是純化的L4,主要功能就是作為T淋巴細(xì)胞的刺激原,廣泛用于免疫學(xué)研究(如作為INF-γ ICS、ELISPOT實(shí)驗(yàn)的陽(yáng)性對(duì)照;或作為PBMC培養(yǎng)的刺激物),也可以作為順行神經(jīng)示蹤劑;PHA-M是植物血凝素的粘性蛋白形式,兩者成分相當(dāng),主要用于刺激外周單個(gè)核細(xì)胞增殖,促進(jìn)某些細(xì)胞因子的產(chǎn)生和膜表面蛋白的表達(dá)。美侖固定液MA0192,有晶體析出不影響,可以室溫或15-20℃水浴溶解之后使用。
答:美侖固定液MA0192,有晶體析出不影響,可以室溫或15-20℃水浴溶解之后使用。說(shuō)明書給的條件是通用條件,可以跟據(jù)自己實(shí)際實(shí)驗(yàn)情況調(diào)整,例如:工作液濃度,染色時(shí)間,孵育條件。
答:說(shuō)明書給的條件是通用條件,可以跟據(jù)自己實(shí)際實(shí)驗(yàn)情況調(diào)整,例如:工作液濃度,染色時(shí)間,孵育條件。有些產(chǎn)品檢測(cè)如果用DMSO作為溶劑的話,DMSO溶劑峰的位置可能會(huì)跟試劑中H的位置有重疊,積分出來(lái)可能會(huì)少H。DMSO溶劑的峰比較大,可能蓋住了試劑里的H。
答:有些產(chǎn)品檢測(cè)如果用DMSO作為溶劑的話,DMSO溶劑峰的位置可能會(huì)跟試劑中H的位置有重疊,積分出來(lái)可能會(huì)少H。DMSO溶劑的峰比較大,可能蓋住了試劑里的H。液相條件不一樣,結(jié)果是不一樣的,標(biāo)準(zhǔn)品可以按照對(duì)應(yīng)批次的美侖液相條件檢測(cè);
確認(rèn)是否為樣本峰,做個(gè)溶劑對(duì)照一下,如果溶劑沒(méi)有那個(gè)峰,而樣品有峰,那就是了。
答:液相條件不一樣,結(jié)果是不一樣的,標(biāo)準(zhǔn)品可以按照對(duì)應(yīng)批次的美侖液相條件檢測(cè);
確認(rèn)是否為樣本峰,做個(gè)溶劑對(duì)照一下,如果溶劑沒(méi)有那個(gè)峰,而樣品有峰,那就是了。
美侖支原體預(yù)防劑(MA0339)可以用于防止支原體污染;支原體清除劑(MA0340)可以用于消除細(xì)胞中已有的支原體污染,加入支原體清除試劑,細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)得稍慢點(diǎn),但能長(zhǎng);如若支原體清除后,可以換成預(yù)防試劑長(zhǎng)期使用,清除試劑不建議長(zhǎng)期用。
答:美侖支原體預(yù)防劑(MA0339)可以用于防止支原體污染;支原體清除劑(MA0340)可以用于消除細(xì)胞中已有的支原體污染,加入支原體清除試劑,細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)得稍慢點(diǎn),但能長(zhǎng);如若支原體清除后,可以換成預(yù)防試劑長(zhǎng)期使用,清除試劑不建議長(zhǎng)期用。